會議速遞｜WHY?HOW?魯鳳民教授深入解析新標志物血清HBV RNA臨床價值
2024-12-05
11月28日，由河南省醫學會臨床檢驗管理分會主辦、鄭州大學第一附屬醫院承辦的“河南省醫院協會臨床檢驗管理分會2024年會暨河南省臨床檢驗中心臨床檢驗室間質量評價總結會”在河南省鄭州市嵩山飯店隆重召開。
本次會議授課專家蕓集，在實驗室能力建設方面主題論壇中， 北京大學基礎醫學院魯鳳民教授做了《從pgRNA病毒樣顆粒的產生看HBV新標識血清RNA的臨床應用》主題報告，報告以“我國慢性乙型肝炎患者診治的成就與挑戰”內容展開，乙型肝炎病毒的發現、病毒學特征；乙型肝炎病毒感染后的階段性疾病進展及結局；HBV 的感染復制周期及核苷（酸）類藥物（NAs）抗病毒治療的靶點；在接受NA治療的患者中，HCC發生風險僅降低~50%, 并未完全消除；新版指南（2022）擴大抗病毒治療后，我國92%的慢性感染者將得到治療；臨床治愈可顯著改善慢性乙肝患者（慢性HBV感染者、HBV相關肝癌患者）遠期不良結局；我們處在核苷（酸）類藥物為主要治療藥物的抗病毒時代，獲得完全病毒學應答的患者，仍有較高的HCC發生風險。
關于HBV RBA病毒樣顆粒的發現、血清HBV RNA的產生路徑、存在形式、來源和特點等做了詳細闡述，同時分享國內肝病領域張文宏研究團隊等工作成果，血清HBV RNA水平反映肝內cccDNA的轉錄活性，血清 HBV pgRNA，是NA治療下HBV DNA ＜ LLOQ后，能夠反映患者肝組織內是否有cccDNA活躍轉錄的唯一指標。
鑒于當下“核苷（酸）類藥物抗病毒時代，亟需新的血清病毒標志物”背景，魯鳳民教授在報告中著重指出，NA治療下患者血清HBV DNA消失后，血清pgRNA檢測可反映cccDNA的轉錄活性，cccDNA的存在是乙肝感染持續、停藥后復發及慢性乙肝難以治愈的主要原因。 cccDNA以微小染色體形式存在于感染肝細胞核內，結構穩定難以清除，而肝組織cccDNA的檢測需要有創的肝穿刺活檢，病人接受度不高，無法廣泛開展，因此臨床亟需能夠反映肝組織內cccDNA存在及轉錄活性度血液替代指標。
當前常用的病毒學指標HBsAg的來源除了cccDNA以外還有整合HBV DNA片段，只有3.5kb超基因組長度的preC mRNA和pgRNA僅可轉錄自cccDNA，因而能反映cccDNA的指標為pgRNA和HBcrAg。
對于新標志物血清HBV RNA的臨床應用，需明確兩個重要問題，一是為何要用，二是如何用。關于此部分內容，魯鳳民教授做了深入詳致的分享闡述。
新標志物血清HBV RNA為何要用？
我們為何要定量檢測血清中的HBV DNA？反映慢性感染和源自cccDNA的病毒DNA復制是否活躍；NA治療下源自cccDNA的pgRNA逆轉錄合成子代病毒DNA的過程是否被抑制；NA治療下DNA合成被完全抑制，即患者血清HBV DNA＜LLOQ，但不等于cccDNA的消失，如何監測？
因而我們需要新型標志物HBV RNA，在NA治療下患者血清HBV DNA檢測不到后，通過HBV RNA檢測反映cccDNA轉錄活性。
另外，鑒于血清HBV RNA的存在形式 ---慢性HBV感染者血清中的HBV RNA很復雜，既來自病毒復制過程(cccDNA)，也來自整合 HBV DNA的轉錄，魯鳳民教授分享指出應排除干擾建立最靈敏的檢測技術。魯教授團隊已發表“標準化血清HBV RNA檢測方法的建立”研究成果，且中國食品藥品檢定研究院已經研制出“乙型肝炎病毒RNA 檢測試劑國家標準品”，適用于HBV RNA 定量檢測試劑盒的質量評價。血清HBV RNA檢測的溯源與標準化，以確保檢測試劑的質量及不同試劑可比性。
新標志物血清HBV RNA如何用？
作為新指標應用臨床關切的重點內容，魯鳳民教授在報告中提出HBV RNA三大應用場景。
場景1--- HBV RNA、或聯合HBsAg預測NA停藥后的病毒學復發。
★ HBV RNA聯合HBsAg，預測停藥后病毒學復發風險效果最優。
場景2--- DNA轉陰后，HBV RNA可持續提示療效。
★ HBV DNA陰性患者中，RNA仍有相當比例陽性，且隨治療時間逐步轉陰。
★ 用于低病毒血癥及DNA陰性患者抗病毒療效監測；HBV RNA可填補HBV DNA監測盲區，HBV DNA轉陰后可持續提示療效，HBV RNA持續陽性，提示治療效果欠佳。
場景3--- 血清HBV RNA預測NA 治療患者的肝細胞癌發生風險。
★ 血清HBV RNA水平與CHB患者肝臟炎癥活動度和肝纖維化分期均相關。
★ NA治療下的持續血清HBV RNA陽性與HCC進展相關，RNA陽性或較高水平，HCC累積復發率越高，總生存率越低。
★今后，從過去單一的控制HBV DNA到控制HBV DNA+ HBV RNA降低HCC發生風險將成為一種應用趨勢。
報告最后，魯鳳民教授對血清HBV RNA 定量檢測當前存在的問題與展望進行了總結。
檢測方面：血清HBV RNA 定量檢測的下限（靈敏度）有待進一步提高；尚無國際標準品，血清HBV RNA 定量的量值溯源及國際標準化是亟待解決的問題。
臨床應用方面：指導安全停藥；NA治療下患者血清HBV RNA檢測陽性預示更高的HCC發生風險；NA治療下患者血清HBV RNA檢測陽性，提示病毒cccDNA仍在有效轉錄表達病毒蛋白、組裝子代病毒顆粒樣pgRNA病毒顆粒。
衛生經濟學方面：在充分發揮其診斷和療效評估價值的同時，最大限度降低患者和社會的經濟負擔。
PS：北京大學擁有血清HBV RNA定量檢測（熒光探針法）專利，通過北京大學專利實施許可，與北京熱景生物聯合研發的國際上首個乙肝病毒前基因組RNA熒光定量檢測試劑盒已上市。
